Fysiske Metoder for en Cell Disruption

Fysiske Metoder for en Cell Disruption


Cell avbrudd er et laboratorium teknikk som brukes til å bryte åpne celler for å trekke ut de innvendige cellulære komponenter i forbindelse med studier eller syntese. Av de mange forskjellige metoder for fysisk cellular avbrudd tilgjengelig, må den valgte metoden være tilpasset programmet for å forstyrre cellen, men beholde proteiner av interesse uskadet.

Perlene Fresing

Perlene fresing er prosessen med mekanisk å forstyrre cellene ved å røre dem i nærvær av små perler. Denne metoden fag-celler for støtkrefter når de kolliderer med de perler, skjærkrefter forårsaket av bevegelse av væsken i hvilken cellene er suspendert og sliper celler mellom perlene. Perlene fresing er egnet for plante- eller dyreceller, så vel som for gjær og bakterieceller, selv om forskjellige størrelser og sammensetninger av perler er egnet for hver enkelt type celle. Ifølge Qiagen Sample & Assay Technologies, de optimale perler til å bruke er: "0.1--0.6 mm bety diameter glassperler for bakterier, 0,5 mm glassperler for gjær og encellede dyreceller, og 3--7 mm rustfritt stål eller wolframkarbid perler for planter og dyr vev. " Perlene fresing forstyrrer cellene og homogeniserer innholdet i ett trinn.

Ultrasonic Cell Disruption

Ultrasoniske lydbølger i størrelsesorden 18 kHz eller mer, noe som er hørbar, kan brukes til å forstyrre cellene. Produksjonen av lydbølger forstyrrer cellene på to måter. Først lydbølgene forårsake bevegelse av væsken som omgir cellene som er tilstrekkelig til å avskjære cellene og "cut" dem åpne. For det andre, ultralyd lydbølger forårsake kavitasjon; lydbølger føre gassbobler for å danne og når sprekker boblene, forårsaker de en fysisk sjokkbølge som er sterk nok til å hule i cellemembraner eller celleveggene, slik at de brekker.

osmotisk sjokk

Osmotisk sjokk benytter cellenes manglende evne til å håndtere raske svingninger i konsentrasjoner av eksterne oppløste stoffer for å tvinge den åpen celle med osmotisk trykk. Denne metoden innebærer å la cellene akklimatisere seg til høye nivåer av eksterne løste stoffer, ofte sukrose, og deretter raskt å fortynne bort sukrose. Cellen, i et forsøk på å balansere osmotiske trykk, vil da ta med vann så raskt at dens indre trykk vil stige og cellen vil briste.

Høytrykks Homogenisering

I denne fremgangsmåten for cellulære forstyrrelser, er en væske i hvilken cellene er opphengt tvunget gjennom en snever åpning under høyt trykk. Cellene utsettes for støtkrefter på slående dysen, skjærkrefter fra bevegelsen av de flytende og trykkfall krefter etter å ha forlatt dysen.