Formålet med Cell Lysis Solution

Celler er de grunnleggende strukturelle og funksjonelle enheter av menneskekroppen. De inneholder flere forskjellige deler som kalles organeller som bidrar til cellens evne til å operere. Energi er gitt av mitokondriene, blir proteinene syntetisert på ribosomer, blir DNA som inneholdes i kjernen og så videre. Hvis en forsker er interessert i å studere en bestemt del av en av disse organeller, er det nødvendig å bryte cellen åpen, eller lysere det, for å isolere de organeller av interesse fra resten av cellen.

Cell Lysis

Dyreceller er bundet ved en semipermeabel membran. På innsiden av cellen, er organeller suspenderes i en væske som kalles cytosol, eller cytoplasma. Cytosol inneholder sukkere, salter, oppløselige proteiner og strukturelle proteiner av cytoskjelettet - en struktur som opprettholder celleform. Cellemembranen kan brytes, eller lyseres, mekanisk, kjemisk eller ved en kombinasjon av de to. For kjemisk lysering blir cellene oppslemmet i en løsning som inneholder detergenter og / eller andre reagenser som forstyrrer de kjemiske bindinger som holder membranproteiner sammen. Dette resulterer i membranen brudd og frigivelse av intracellulære komponenter.

subcellulære fraksjonering

Når cellene har blitt lysert, er det nødvendig å separere den organellen eller proteinet av interesse fra resten av komponentene. Differensialsentrifugering bruker tyngdekraften til individuelle objekter av tetthet. Reagensglass inneholdende celle løsninger er spunnet i en sentrifuge ved progressivt høyere RPM (omdreininger per minutt), og skaper en pellet eller en brøk som inneholder de tyngste organeller i bunnen av røret med hvert spinn.

rensing

Når fraksjonen av interesse er blitt oppnådd, må det renses. Rensing fjerner forurensninger ved å utnytte forskjeller i molekylære egenskaper, for eksempel kostnad, form eller størrelse. For eksempel kan den fraksjon av interesse inneholder to proteiner som pelleterte sammen på grunn av likheter i tetthet til tross for at de har svært forskjellige størrelser. For å separere den uønskede proteiner fra den ene som studeres, ville det være logisk å bruke en annen metode for å isolere proteinene etter størrelse.

Relevans til sykdom hos mennesker

Evnen til å lysere cellene og skille bestemte komponenter har gitt medisinske forskere og legemiddel utviklere med viktig innsikt i epidemiologi av visse sykdommer hos mennesker. For eksempel kan membraner av kreftceller sammenlignes med de til normale celler for å utvikle behandlinger som ødelegger tumorceller, men er ufarlige for friske celler. Cellelysering blir også brukt til å studere Alzheimers sykdom, metabolske forstyrrelser og mye mer.

betraktninger

Ikke alle cellene er skapt like, så det er viktig å tilpasse protokollen som brukes for lysering av egenskapene til din spesielle cellepopulasjon. Det er like viktig å vurdere nøyaktig hvordan du har tenkt å studere den komponenten av interesse. Hvis man ønsker å analysere aktiviteten av et enzym, ville det være ulogisk å bruke en oppløsning stand til å ødelegge enzym funksjon. Produsenter av kjemiske reagenser som brukes til cellelyse er vanligvis glade for å hjelpe deg å finne dine behov.