Hva er funksjonen til Gel elektroforese?

Gel elektroforese er en kraftfull teknikk som brukes til å rense og separate molekyler inneholdt i en blanding, og for å anslå deres størrelse. Når dette er oppnådd, kan molekylene (vanligvis store biologisk relevante seg slik som nukleinsyrer og proteiner) behandles videre eller analysert for å identifisere deres eksakte natur ved hjelp av en rekke forskjellige teknikker som krever rene eller nesten rene materialer for å fungere korrekt.

Mekanisme

Gelelektroforese virker ved å påføre et elektrisk felt til en porøs matrise (gelen) hvor en blanding av molekyler som har blitt innført. Siden de fleste molekyler er enten positivt eller negativt ladet, vil den nåværende tendens til å gjøre dem flytte. Tvert imot vil det gelmatriks forsinker dem. Resultatet er at mindre molekyler vil bevege seg raskere enn større. Etter en tid vil identiske molekyler alle være sammen på samme sted, atskilt fra andre molekyler. Det er vanlig å legge til, i det samme utgangspunkt men i en annen bane, til en blanding inneholdende molekyler av flere kjente størrelser sammenlignes med de i den ukjente prøve. Dette gir oss muligheten til å anslå deres størrelser fordi molekyler av lignende størrelse reise lignende avstander.

typer

Selv om det grunnleggende prinsippet er den samme, er det flere typer av gelelektroforese, avhengig av type og størrelse av molekyler for å skille. Den viktigste variabelen for å ta hensyn til er størrelsen på gel matrix porene. Hvis de er for store, vil alle molekyler reise sammen, og hvis de er for små, vil de ikke reise i det hele tatt. Den korrekte porestørrelse oppnås ved å variere komponentene og mengdene som brukes til å lage matrisen, og er avhengig av størrelsen på molekylene av interesse.

Resultat

Resultatet av en elektroforese er en serie av flekker på gelen, som hver opptas av kopier av det samme molekyl. Imidlertid, siden mange biologisk relevante molekyler er usynlige ved normalt lys, kan det være nødvendig å ytterligere behandle gelen for å finne dem. To mye brukt teknikker som gjør det mulig for visualisering av plassene er å legge en farge som vil farge spesifikt molekylene vi er interessert i, og observere gelen under ultrafiolett lys.

applikasjoner

Gelelektroforese er mye brukt i alle tilfeller hvor det er nødvendig å separere og isolere biologiske molekyler, slik som nukleinsyrer (DNA, RNA) og proteiner. Eksempler på fagområder der dette er vanlig er etterforskning, medisin, molekylærbiologi og biokjemi.

Eksempel

Etterforskerne kan bruke gel elektroforese å lage en profil av DNA funnet i et åsted og sammenligne den med de hentet fra mistenkte. Selv om en kamp ikke garantere skyld, kan prøvene som ikke samsvarer utelukkes fra videre analyse, noe som sparer mye penger og tid.