Hva Er T Cell Proliferation Assay Protocol?

Hva Er T Cell Proliferation Assay Protocol?


T celler er de mest tallrike type hvite blodceller som spesialiserer seg på binding til antigen eller utenlandske enheter. Laboratorie proliferasjonsanalyser for T-cellene kan anvendes til å studere cellemedierte immunresponser i dyr.

T Cell Rensing

Renseprosedyrer blir utført før forsøket begynner. T-celler tatt fra milt eller lymfeknuter av dyr er renset med en Dulbeccos Minimum Essential Medium (DMEM) vask. Vaskingen blandes for å inneholde den samme type normalt serum som de animalske celler som blir undersøkt, penicillin-streptomycin og den kjemiske 2-merkaptoetanol.

inkubasjon

T-cellene må inkuberes i en inkubator ved en temperatur på 37 grader Celsius i minst tretti minutter. Cellene blir deretter satt inn i en sentrifuge i minst åtte minutter ved 800 omdreininger i minuttet.

Proliferation Assay

T-celler ble oppløst ved hjelp av varme DMEM og en sentrifuge ved 10,0000 omdreininger i minuttet. De blir deretter overført til en steril beholder eller et rør og avkjølt i et -20 grad fryser. T-cellene blir proliferert ved å plassere dem i en 96 brønners plate og inkubering i en karbondioksid inkubator i noen dager. 0,5 til 1,0 milli-curie av tre hydrogen merket tymidin ble tilsatt til brønnene og inkubert i ytterligere 15-18 timer. Cellene blir deretter satt på et glassfilter for scintillasjonstelling (strålingsdeteksjon i celler).