Hvordan å fordampe en DNA Solution
DNA er en nødvendig ingrediens i ethvert laboratorium der fokus for studien er genetikk eller protein transkripsjon fordi det er fra DNA som genene er transkribert. Når DNA er hentet fra enten bakterier eller pattedyr, noen ganger resultatene gir en lav avkastning. Når konsentrasjonen av DNA er for lav i den endelige oppløsning fremstilt fra ekstraksjonen, er det ineffektivt i ytterligere forsøk, og må lyofiliseres og rekonstitueres for å øke dens konsentrasjon. Tilberedning betyr å legge vann. Fordamper DNA uten å forurense det krever mer fokus og er nøkkelen trinnet i vellykkede DNA konsentrasjonen øker.
Det finnes to vanlige metoder for å fordampe DNA-løsninger. Fordampning i et rør krever tilsetning av et salt for å skape en DNA-pelleten, men er bedre for DNA-plasmider eller små segmenter fordi de ikke koagulerer meget. Fordampning på en glass-stav som fungerer best for genomisk DNA fra pattedyrprøver fordi dette DNA er ofte tykkere og kan nøye plukket opp med en kjedelig instrument.
Bruksanvisning
Glass Rod Method
1 Det dobbelte volumet av DNA-løsningen ved tilsetning av 100% etanol lik volumet av DNA løsningen.
2 Dypp glasset stangen forsiktig inn i genomisk DNA løsningen sakte røre den. Unngå å emulgere blandingen. DNA er inneholdt i grenseflaten mellom etanolen og den opprinnelige DNA-oppløsningen.
3 Spin stangen forsiktig mellom tommelen og pekefingeren til å vri DNA rundt stangen.
4 Fjerne stangen. På slutten av det skal være noe som ser klar og tyktflytende. Det er DNA.
5 Legg stangen over et andre glasstav i en vinkelrett mote så det er ikke berøre bordet.
6 Dekk til DNA på stangen for å beskytte den mens den tørker.
salt Method
7 Tilsett 10% av det totale DNA-oppløsningen volum natriumklorid-løsning til å aggregere DNA.
8 Knips forsiktig på røret med en pekefinger for å blande DNA løsningen med salt.
9 Tredoble det totale volum av oppløsningen ved tilsetning av 100% etanol. På dette punkt blir det DNA ofte tydelig sees med det blotte øye.
10 Spinne ned DNA i røret ved hjelp av en sentrifuge på maksimal hastighet i 30 sekunder.
11 Kast supernatanten.
12 Legg til en volum av den opprinnelige DNA-oppløsning av 70% etanol for å skylle bort salt. Kast etanol skylling, bevare pelleten. Dersom pelleten blir løsnet fra bunnen av røret, spinner den igjen i sentrifugen ved full hastighet i 30 sekunder.
1. 3 Gjenta trinn 6 to ganger til.
14 Tørk røret ved å la den sitte på sin side hvor det ikke vil bli forstyrret.