Hvordan å gjøre en Gram Stain

Gram-farging er en prosedyre som vanligvis anvendes i biologi og medisin for å bidra til å skille mellom Gram-positive bakterier og Gram-negative bakterier. Her er hvordan du gjør en Gram flekken.

Bruksanvisning

1 Plassere en prøve av en bakteriekultur på et objektglass. En vaksinasjon sløyfe kan brukes til å overføre bakterier til raset.

2 Bruk en trepinne til å smøre bakteriekultur over objektglass. Du ønsker å ha et tynt jevnt lag av kultur på lysbildet.

3 Tørk det lysbilde som inneholder bakteriekultur. Dette er ofte gjort ved å holde den gli over en liten flamme fra en Bunsen-brenner.

4 Hell krystallfiolett flekk over bakterieprøve på lysbildet. La sleiden står for rundt 10 til 60 sekunder, avhengig av tykkelsen på smøre på lysbildet. Skyll krystallfiolett flekken ut av raset med vann.

5 Plasser Gram jod løsning på bakterieprøve. La smøre stå i ytterligere 10 til 60 sekunder, avhengig smøre tykkelse. Skyll av ekstra Gram jod løsning med mer vann.

6 Legg noen dråper en decolorizer til bakteriell smøre på lysbildet. Decolorizers som ofte brukes er enten aceton eller alkohol. Skyll decolorizer ut av lysbildet når decolorizer ikke lenger farget av tidligere flekker som decolorizer går ut av raset. En typisk tid for dette er ca 5 sekunder.

7 Sett en counterstain, som for eksempel grunnleggende fuksin løsning eller safranin, på lysbildet over bakterieprøve. La counterstain å forbli på smøre for ca 40 til 60 sekunder, og deretter skyll av counterstain med vann. La lysbilde for å lufttørke.

8 Bruk et mikroskop for å undersøke raset som inneholder bakterieprøve. Gram-positive bakterier vil bli farget fiolett, og Gram-negative bakterier vil ha en rød eller rosa farge.

Hint

• Følg alle laboratorie sikkerhetsstandarder ved arbeid med kjemiske løsninger, bakterier prøver og brann.