Hvordan å gjøre en Spektrofotometri på kobber sulfat

Vannfritt (uten vann) kobber (II) sulfat er grå-hvit i farge, men den mer vanlige kobber (II) sulfat-pentahydrat er en fin nyanse av blått lys, og kobber (II) sulfat oppløst i vann danner en blå løsning. Det er fordi det absorberer lys i den rød-oransje delen av spekteret, slik at øynene oppfatter det som å være blå. Man kan bruke et spektrofotometer for å finne den maksimale absorpsjonsbølgelengde for kobber (II) sulfat og deretter bestemme konsentrasjonen av en ukjent løsning.

Bruksanvisning

1 Slå på Spec20; det er behov for å varme opp i minst en fjerdedel av en time før bruk.

2 Ta på deg hansker, lab frakk og briller, og ikke fjerne dem for resten av prosedyren. Du bør alltid bære lukket-toed sko når du arbeider i et laboratorium.

3 Ta fem av reagensrør og merke dem som Std 1, Std 2, Std 3 osv Legg til følgende mengder av 0,050 M kobber (II) sulfat stamløsning og dH2O til hver:

Std 1: Tilsett 10 ml kobber (II) sulfat lager

Std 2: Legg 8 ml kobber (II) sulfat lager og 2 ml dH2O

Std 3: Legg 6 mL kobber (II) sulfat lager og 4 ml dH2O

Std 4: Tilsett 4 mL kobber (II) sulfat lager og 6 ml dH2O

Std 5: Tilsett 2 mL kobber (II) sulfat lager og 8 ml dH2O

4 Ta de andre fem reagensrør og merke dem som Ukn 1, Ukn 2, Ukn 3, etc. Disse rørene vil inneholde utvannet løsninger av prøven eller ukjent, løsningen hvis konsentrasjonen du håper å avgjøre. Legg følgende beløp hver:

Ukn 1: Tilsett 10 ml av ukjent løsning

Ukn 2: Legg 8 ml ukjent og 2 ml dH2O

Ukn 3: Legg 6 mL ukjent og 4 ml dH2O

Ukn 4: Tilsett 4 mL ukjent og 6 ml dH2O

Ukn 5: Tilsett 2 mL ukjent og 8 ml dH2O

5 Lukk dekselet på kyvetten. Med dekselet lukket og bølgelengden er satt til 400 nm, skal% T være 0. Hvis ikke, må du justere det med rattet på høyre side slik at den leser null.

6 Legg dH2O til kyvetten til den når streken, og sett kyvetten inn i Spec20. Sjekk nå% T. Det bør være 100%. Hvis det ikke er det, juster% T før det er nøyaktig 100 med rattet på høyre side, ta deretter kyvetten og kontrollerer at% T uten kyvette satt inn er fortsatt 0.

7 Ta Std 1 testrøret (som inneholder 10 ml av kobber (II) sulfat lager) og overføre innholdet til den andre kyvette. Dekk til andre kyvetten med parafilm og invertere det å blande, og deretter fjerne Parafilm og tørk kyvetten med en Kimwipe å rense overflaten. Sett kyvetten inn i Spec 20. Begynn med bølgelengde på 400 nm og registrere% T.

8 Endre bølgelengde i trinn på 20 nm (420 nm, 440 nm, 460 nm og så videre) og nullstille spektrofotometer ved hver bølgelengde (dvs. sjekker at% T for en tom spektrofotometer er 0, mens% T for den første kyvette, hvilken bare inneholder rent vann, er 100%). Sett andre kuvette (den som inneholder kobber (II) sulfat stamløsning) og registrere% T ved hvert punkt. Skriv ned disse verdiene i en tabell på et ark. Stopp når du har nådd 660 nm.

9 Bestem hvilke bølgelengde tilsvarer den laveste% T. Dette er absorpsjon maks. Sett spektrofotometer til denne bølgelengde.

10 Re-kontrollere kalibreringen (dvs.% T bør fortsatt være 0 når dekselet er lukket og spektrofotometer er tom, og% T for rent vann bør fortsatt være 100%).

11 Noter% T for Std. 1, deretter tømme og rengjøre kyvetten. Overfør innholdet i Std. 2 til kyvetten og gjenta målingen for Std. 2. Merk at du ikke trenger å sjekker kalibreringen mellom hver av disse målingene.

12 Mål% T for hver av de 10 løsningene du forberedt.

1. 3 Rengjør arbeidsområde, og deretter fjerne beskyttelsesbriller og hansker.

14 Overfør data for de Std løsninger til en datamaskin regnearkprogram. For hver Std løsning, angir konsentrasjonen av den løsningen og den% T du spilte.

15 Har regnearkprogram konvertere% T i absorbans for deg. Du kan gjøre dette ved å spørre regnearkprogram for å bruke følgende formel: absorbans = log (100% /% T). Den nøyaktige måten du legger inn denne formelen vil trolig avhenge av regnearkprogram du bruker; se i brukerhåndboken / hjelpesiden for mer informasjon.

16 Be regnearkprogram til å tegne absorbans mot konsentrasjonen, med konsentrasjon på x-aksen og absorbans på y. Deretter instruere regnearkprogram til å passe en ligning til disse dataene ved hjelp av lineær regresjon.

17 Ved hjelp av regnearkprogram, konvertere% T for alle dine Ukn prøver å absorbans. Finn minst tre som har absorbans verdier i det samme området som de Std løsninger.

18 Beregne konsentrasjonen av kobber (II) sulfat i hver av de fortynnede oppløsninger Ukn ved å plugge absorbansen for hver i ligningen avledet av regnearkprogrammet. Siden det er en lineær ligning, bør dette være en ganske grei beregning, men du kan alltid bruke regnearkprogram til å gjøre det for deg hvis behovet være.

19 Bruk konsentrasjon man har beregnet for hver av de tre oppløsninger Ukn man brukte for å bestemme den opprinnelige konsentrasjonen av ufortynnet ukjent. Ukn 1, for eksempel, er ufortynnet, slik at dens konsentrasjon er den samme som av den opprinnelige ukjente oppløsning. Ukn 2, men inneholder 8 ml ukjent og 2 ml vann, slik at man kan finne den konsentrasjonen av den opprinnelige ufortynnet fra Ukn 2 ved å dividere med 0,8. For Ukn 3, vil du dele med 0,6, for Ukn 4 med 0,4, og for Ukn 5 med 0,2.

20 Gjennomsnittlig dine tre resultatene for å gi deg konsentrasjonen av kobber (II) sulfatløsning prøven.

Hint

• Kobber (II) sulfat pentahydrat er en mulig øye og hudirriterende.