Hvordan beregne Beregninger for Spektrofotometere

Hvordan beregne Beregninger for Spektrofotometere


Et spektrofotometer blir brukt til å bestemme konsentrasjonen av visse forbindelser, slik som proteiner, i en oppløsning. Generelt, for å kaste lys gjennom kyvetten fylles med en prøve. Mengden av lys som absorberes av prøven blir målt. Siden forbindelser absorberer lys i ulike spektrale områder, må riktig bølgelengde stilles for analysen. Det er mange måter å beregne konsentrasjonen av ukjente prøver gjennom spektrofotometri, men ved hjelp av referansestandarder gir best nøyaktighet. Videre standarder også vise om spektrofotometer er funksjonsfeil eller andre problemer med analysen.

Bruksanvisning

Beregning gjennom rett linje ligninger

1 Analyser referansestandarder ved begynnelsen av analysen. Standarder er kjent konsentrasjoner og brukes til å kalibrere utstyr og sjekk nøyaktighet. Alle prøver skal falle innenfor arbeidsområdet av standardene. Hvis ikke, så prøvene må bli fortynnet eller konsentrasjonen av standarder økt.

2 Lag en punktdiagram eller linjediagram med standard konsentrasjon og absorpsjon målinger. Konsentrasjonen vil være på y-aksen, sugeevne på x-aksen. For eksempel, standardene er 1 ppm, 2,5 ppm, og 5 ppm. Absorberingsevnen gitt var 1 ppm = 0,25, 2,5 ppm = 0,5 og 5 ppm = 0,75.

3 Formater trendlinjen for å vise en ligning på grafen. Ligningen viser formelen y = mx + b. For eksempel bruker standardene i trinn 2 ligningen y = .1224x + 0,1531. De fleste trendlinjer er mottatt på null, men det avhenger av analysemetode og R-kvadrert verdi.

4 Analyser ukjente prøver og registrere absorpsjonsevne opplesninger.

5 Bruk ligning (y = mx + b) for å bestemme konsentrasjonen av prøver.

Forstå Rett Linje Equation

6 La "Y" lik konsentrasjon. Dette er hva som vil bli løst for.

7 La "X" lik absorpsjonsevnen til prøven. Dette er den absorpsjonsevne måles av spektrofotometer.

8 Tillat "" til lik stigningstallet og "b" til lik y-aksen. Begge er gitt, men hvis trendlinjen ble tvunget til 0, deretter "B" vil være 0.

9 Løs for konsentrasjon. Ved å bruke eksempelet i trinn 3, erstatning "x" som en gitt absorberingsevne av 0,563. Derfor:

y = 0,1224 (0,563) + 0,1531

y (konsentrasjon) = 0,222011

Hint

  • Enhetene for konsentrasjon vil være den samme som standardene. For eksempel enheter er deler per million (ppm) eller deler per milliard (ppb).
  • Referansestandarder og prøver er lett forurenset.
  • Alltid lese alle deler av analyse eller metode før utvikle.