Hvordan beregne CFU Fra fortynning

CFU står for kolonidannende enheter, et begrep i mikrobiologi brukes til å kvantifisere hvor mange bakterier er tilstede i en løsning. Avhengig av konsentrasjonen av prøven, må du utføre flere fortynninger og plate de ulike prøvene på petriskåler. Hvis det er for mange bakteriekolonier, vil de være vanskelig å telle, og hvis det er for få, kan prøven ikke representativt. Det er vanligvis en god ide til platen den opprinnelige løsningen, deretter en 1/10-fortynning (1 del løsning, 9 deler saltvann), en 1/100 fortynning og eventuelt en 1/1000 fortynning.

Bruksanvisning

Beregning CFU fra Bakteriell fortynning

1 Utfør en foreløpig opptelling av hver tallerken når bakteriene har hatt tid til å ruge, vanligvis en eller to dager. Du ønsker å telle bare individuelle kolonier, som bør være tydelige, isolerte punkter, ikke en hel blob av ulike kolonier vokst sammen. Velg plate som har mer enn 30 av disse koloniene, men mindre enn 300.

2 Tell antall individuelle kolonier. Dette er CFU nummeret til fortynning - du blir nødt til å utføre en enkel beregning for å bestemme CFU av den opprinnelige prøven. For dette eksemplet vil en hypotetisk plate inneholdende 46 kolonier anvendes.

3 Bestemme størrelsen på den fortynning dere anvendes. Ideelt sett, merket du de petriskåler på forhånd. For dette eksempelet, kan du blande 1 ml av bakteriekultur med 99 ml saltvann. Dette er en 1/100 fortynning.

4 Multipliser graden av fortynning av hvor mye du faktisk belagt. Hvis, i dette eksempelet, belagt man 0,1 ml av en 1/100 fortynning på agar, multipliserer man 0,1 x 1/100, for et resultat av 1/1000 eller 0,001.

5 Del CFU av fortynningen (antall kolonier du telte) av resultatet fra trinn 4. For dette eksempelet ville du dele 46 av 1/1000, som er det samme som å multiplisere med 1000. Resultatet er 46 000 CFU i den opprinnelige prøven.