Hvordan beregne Km

Enzymer er proteiner som katalyserer biokjemiske reaksjoner. Et enzym samhandler med et molekyl, vanligvis kalt et substrat, og gjør den til et produkt. Hastigheten av reaksjonen avhenger av substratkonsentrasjon ([S]). Men, i en viss konsentrasjon, oppnår hastigheten maksimumsverdien (Umax). Km er Michaelis en konstant som er den substratkonsentrasjon ved hvilken reaksjonshastigheten er halvparten av maksimalverdien. Km kan beregnes ut fra Lineweaver-Burk plott 1 / V = ​​(1 / Vmax) + (Km / Vmax) x 1 / [S] (se figur). For denne grafen er eksperimentelle data som er representert som svarte prikker plottet ved hjelp av de følgende koordinater: den gjensidige substratkonsentrasjon (1 / [S]) og den gjensidige reaksjon hastighet (1 / V).

Bruksanvisning

1 Skaff en ligning som representerer Lineweaver-Burk plot. For eksempel, er det
1 / V = ​​240,5 + 577,2 x 1 / [S].

2 Dividere en av den første koeffisient i ligningen fra trinn 1 for å beregne den maksimale hastighet (Vmax). I vårt eksempel er Vmax 1 / 240,5 = 0,0042.

3 Multipliser andre koeffisienten i ligningen fra Trinn 1 av Vmax å beregne Michaelis konstant Km. I vårt eksempel, Km = 0,0042 x 577,2 = 2,42.