Hvordan er rekombinant DNA Identifiserte?

All informasjon som er nødvendig for å skape en organisme befinner seg i sitt DNA. En base bestående av sukker, fosfat og en nitrogenbase utgjør DNA. Det er fire nitrogenbaser, adenin (A), thymin (T), guanin (G) og cytosin (C). Hver nitrogen basis alltid par med sin motpart. Adenin vil pare med tymin og cytosin vil pare med guanin. Alle organismer som bærer de samme fire nitrogenbaser. Det som skiller en organisme fra hverandre er det antall baseparing, og rekkefølgen av deres ordninger. Protein gir en organisme sin struktur. En kompleks kjemisk prosess svinger DNA til budbringer RNA (mRNA) og mRNA til slutt blir translatert til protein, som gir organismen sin endelige struktur.

rDNA Definisjon

Rekombinant DNA (rDNA) er det generelle navn for å ta en del av en DNA, og å kombinere den med en annen tråd av DNA. Det hjelper hvis du tenker på rDNA som chimera DNA. (A chimera var en gammel gresk monster som består av en løvekropp med en geit hode kommer ut av ryggraden med en slange for halen.) Når forskerne kombinere to eller flere forskjellige tilnærmingene av DNA, er de i stand til å lage en ny tråd av DNA. Ved å kombinere DNA av to forskjellige organismer er den mest vanlige rekombinante prosessen.

rDNA Produksjon

Før du kan forstå hvordan å identifisere rDNA, må du ha en forståelse av hvordan forskere skaper rDNA i første omgang. De tre metodene for rDNA produksjon er transformasjon, ikke-bakteriell transformasjon og fag innledning.

Transformation

I transformasjon, setter du en valgt del av DNA i en vektor, og deretter klippe det stykke av DNA med et restriksjonsenzym. Deretter bruker man-DNA-ligase for å sette inn DNA innskuddet i vektoren. Vektoren innføres i en vertscelle (vanligvis E. coli), som er spesielt fremstilt for å ta opp det fremmede DNA.

Ikke-bakteriell Transformation

Dette ligner på transformasjon, med unntak av at vertscellene er ikke-bakteriell. Enten setter vektoren via mikroinjeksjon hvor DNA blir satt direkte inn i kjernen, eller gjennom biolistics hvor høyhastighetsmikroprosjektiler bombarderer vertscellene til vektor-DNA er absorbert.

fag Innledning

Fag innledning er prosessen med transfeksjon, som er ekvivalent med transformasjon. I stedet for å bruke en bakterie, vil du bruke en fag som lambda eller M13.

rDNA Identification

Når du forbereder din vektor, vil du formatere dem med en seleksjonsmarkør. Denne markøren vil gjøre deg og andre til å skille transformerte verter med rDNA fra ikke-transformerte verter. Den mest brukte selekterbar markør er et antibiotikum markør. Ved å bruke et antibiotikum markør, kan du raskt identifisere hvilke celler inneholder rDNA fordi eksponering for visse antibiotika vil drepe en vertscelle uten rDNA fordi det ikke er resistente mot antibiotika. Eventuelle celler som er resistente mot antibiotika er de som inneholder vektoren og, derfor, den rDNA.