Hvordan forberede Buffer Solutions

Bufferløsninger motstå endringer i pH-verdi, fordi de inneholder svake syre-base-konjugater som nøytraliserer H + og OH ioner. Bufferløsninger består av svake syrer eller baser og saltet av den syre eller base. Valg av et passende buffersystem er avhengig av pH-området for bufring. De fleste biologiske reaksjoner forekommer ved et pH-område på 6 til 8. fosfatbuffere bufre over hele pH-området 6,5 til 7,5. Karboksylsyre-buffere er anvendelige fra pH 3 til 6. boratbuffere fungere fra pH 8,5 til 10. aminosyre buffere så som glycin og histidin utføre over et mangfold av pH-områder. Tris buffer er en av de mest brukte buffersystemer i biologiske laboratorier. Beregninger for en tris-buffer vil bli brukt i det følgende eksempel, men metodikken gjelder alle bufferløsning.

Bruksanvisning

1 Bruk av produktet i den endelige oppløsning molariteten og volum for å bestemme mol av basen er nødvendig. For eksempel, hvis 2 liter av en 0,1 M oppløsning av Tris-buffer er nødvendig, da det antall mol av Tris kreves er:

0,1 mol / liter x 2 liter = 0,2 mol tris-base

2 Beregne massen av buffer som kreves ved å multiplisere antall mol som kreves av molekylvekten av basen. For eksempel kan massen av 0,2 mol av Tris-base tilsvarer:

0,2 mol Tris x 121,1 g / mol Tris = 24,22 g Tris

3 Måle den aktuelle masse av basen på en skala.

4 Oppløse basen i destillert vann ved hjelp av en magnetisk rørestav og rørevarmeplate. Oppløse den i et volum vann bare litt mindre enn den endelige oppløsning volum (950 til 975 ml for hver liter endelig oppløsning). PH i Tris-buffer forandrer seg med konsentrasjon, og trenger omstilling hvis en for liten innledende volum er brukt. Det er også viktig å fremstille bufferen ved den samme temperatur vil det bli brukt under analyse eller eksperiment som Tris har store temperaturavhengige endringer i pH.

5 Titrere den vandige Tris løsning med 1 M saltsyre ved hjelp av et pH-meter.

6 Bringe oppløsningen til sluttvolumet med destillert vann i en volumetrisk kolbe.

Hint

• For å spare tid ved fremstilling av en bufferløsning, kan bruke forhåndslagde buffer konsentrerer seg på den nødvendige pH-verdi og fortynnet til ønsket molaritet og volume.Prepare bufferløsning ved den samme temperatur vil det bli brukt for å unngå betydelig pH changes.Avoid tidkrevende pH-justeringer, titrere bare etter fortynning til den ønskede konsentrasjon. Oppløsning i altfor lite volum vil føre til gjentatte titreringer.
• Vær forsiktig når du håndterer syrer og bases.Wear vernebriller.