Hvordan forberede fosfatbuffere

Buffere er blandinger av syrer og baser som er bestandige mot endringer i pH. Fosfatbuffere kan fremstilles i pH-området på 5,8 8,0. De fleste vitenskapelig referansebøker gi instruksjoner for å fremstille 100 ml av en gitt bufferoppløsning. Dersom det er ønskelig med mer eller mindre løsning, instruksjonene er direkte skalerbar (f.eks, for å forberede 1000 ml, bare multiplisere alle målinger og volumer av 10).

Bruksanvisning

1 Ta med ca 250 ml destillert vann til en rullende koke i minst 15 minutter, og avkjøl. Etter avkjøling, bør vannet overføres til en lukkbar beholder for å forhindre absorpsjon av karbondioksyd fra luften (Karbondioksid danner karbonsyre og vil endre pH-verdien i vann).

2 Fremstille 100 ml av 0,2 mol / l stamløsning A ved å oppløse 2,40 g NaH? PO? i kokt destillert vann og fortynne til 100 ml i den graderte sylinder. Overføre denne løsning til en ren plastbeholder.

3 Fremstille 100 ml 0,2 mol / l stamløsning B ved å oppløse 2,84 g Na? HPO? i kokt destillert vann og fortynne til 100 ml i den graderte sylinder. Overføre denne løsning til en ren plastbeholder.

4 Se i buffer tabellene ved University of California, Berkeley (se linken under Referanser) for å finne de riktige proporsjonene av A og B (oppført under "Sorensen fosfatbuffer"). Som et eksempel, en bufferoppløsning med pH 7,0 forutsetter 39,0 ml av A og 61,0 ml av B.

5 Bland stamløsninger (ved hjelp av målesylinder) i de riktige proporsjoner for den ønskede pH og rist godt. Hvis en pH-meter eller pH test papir er tilgjengelig, teste løsningen for å bekrefte sin pH. Overfør bufferoppløsning til en lukkbar plastbeholder for lagring. Vær oppmerksom på at bufferløsninger vanligvis har en holdbarhet på 6 måneder

Hint

  • Natriumdihydrogenfosfat og dinatriumhydrogenfosfat er ikke spesielt farlige materialer, men bruken av vernebriller er likevel anbefales.