Hvordan gjennomføre en Gel elektroforese Lab

I biologi, er gelelektroforese en av de enkleste måtene for å separere og analysere DNA, RNA eller proteiner. Prøven som skal analyseres blir ofte fremstilt før gjennomføring av den elektroforese. Den vanligste gel som brukes for DNA eller RNA er agarose, mens protein elektroforese bruker ofte polyakrylamidgeler. Ved ferdigstillelse av forsøket, vil du ha data som vil gi deg de molekylære data for prøven blir testet. Bestemme molekylære størrelsen av DNA er en av de vanligste årsakene til å kjøre dette eksperimentet.

Bruksanvisning

1 På et plant underlag, plassere skuffen med forberedt gel horisontalt i elektroforese kammeret. Hell elektroforese buffer over gel til den er helt dekket. Deretter bruker en pipette til å laste den første brønnen med bromfenol blått fargestoff. Dette brønner 'kjørefelt vil bli kjent som markør kjørefelt.

2 Bland prøven med lasting buffer. Være sikker på at blandingen er forholdsvis tykk for å sikre at prøven synker til bunnen av gelen er bufferløsning. Ved hjelp av en pipette, sette en liten dråpe inn i resten av brønnene på gelen.

3 Sett lokket på kammeret og slå på strømkilden. Små bobler i bufferløsningen skal være synlig for å indikere en passende strøm.

4 La den nåværende til å kjøre inntil fargestoff i markør kjørefelt er ca 2 cm fra kanten av gel og deretter slå av strømkilden.

5 Sug gelen i etidiumbromid i ca 8 minutter. Deretter undersøke resultater under en ultrafiolett lyskilde. Du kan bruke distanse av bandene å utføre beregninger knyttet til molekylvekt eller annen slik informasjon du ønsker å finne.

Hint

  • Pass på å følge nøye med på markøren bandets posisjon for å hindre at elektroforese fra å gå på for lenge og ødelegger results.There er en mulighet for at du kan ha til å kjøre samme eksperiment et par ganger for å få de resultatene du ønsker. Ikke la dette frustrere deg som det skjer ofte til alle.
  • Etidiumbromid er svært kreftfremkallende. Vær forsiktig når du håndterer dette kjemikaliet og aldri røre det med bare hendene.