Hvordan Grow bakterier fra jord

Et antall fremgangsmåter eksisterer for å studere mikrobielle samfunn i jorda. En teknikk er å dyrke et bredt spektrum av bakterier som lever i jorden. For å oppnå dette, et medium som fremmer veksten av et stort antall bakteriearter (betegnet "ikke-selektive") er nødvendig. Et populært valg er Nutrient Agar, som er kommersielt tilgjengelig eller kan opprettes fra kjøttekstrakt, pepton og agar. Serielle fortynninger er ofte laget av jordprøvene for å skape håndterbare koloniene i kulturen for å lette ytterligere undersøkelser.

Bruksanvisning

Samle Samples

1 Bestemme jordprøvetakingsprosedyre, inklusive prøve størrelse, plassering (vertikal og horisontal) og frekvens prøvene skal tas. En veldig enkel jord-sampling prosedyren kan være et enkelt, 2-milliliter prøve av overflatejord tatt i en beite på en bestemt dag.

2 Samle de ønskede jordprøver, noe som sikrer ingen forurensning av prøvene. En plastengangssprøyte, kan modifiseres til et utmerket verktøy for prøvetaking ved å fjerne spissen og sterilisering av sprøyten. En ekstra fordel til denne enheten er brukervennligheten som utvalgsstørrelsene kan måles i volum.

3 Oppbevar prøvene ved romtemperatur til den er klar til å dyrkes. Prøvene bør dyrkes innen 72 timer etter prøvetaking.

Utarbeidelse av Fortynninger

4 Legge til ett gram av jordprøve til 99 milliliter fosfatbuffer saltvann (PBS). Dette vil skape en 1/100 fortynning av jordprøven, og beholderen bør merkes på riktig måte.

5 Rør eller riste oppløsningen kraftig i minst ett minutt. Hensikten med omrøring er å suspendere organismene i oppløsningen.

6 Tillat jord partikler til takke med opp til 15 minutter. Dekanter væskedelen i prøveglass som er merket med de aktuelle prøven og fortynningen (1/100).

7 Overfør en milliliter av den 1/100 fortynning i et prøverør som inneholdt 9 ml PBS ved hjelp av en steril pipette. Dette vil skape en 1/1000 fortynning av prøven. Rist testrøret inntil prøven er grundig blandet, og sikre at prøven er merket med de aktuelle prøven og fortynning.

8 Overfør en milliliter av den 1/1000 fortynning i et prøverør som inneholdt 9 ml PBS ved hjelp av en steril pipette. Dette vil skape en 1 / 10.000 fortynning av prøven. Rist testrøret inntil prøven er grundig blandet, og sikre at prøven er merket med de aktuelle prøven og fortynning. Ytterligere fortynninger kan opprettes etter behov ved å gjenta prosessen i trinn 4 og 5.

dyrkingen

9 Fremstille petriskåler for dyrking ved å helle oppvarmet (45 ° C) Nærings-agar på sterile petriskåler inntil bunnen av platen er dekket. Legg til en milliliter av den 1/100 fortynning til platen.

10 Forsiktig virvle agar på undersiden av platen når den avkjøles. Merke plate med tilsvarende prøve og fortynning (1/100).

11 Gjenta trinn 1 og 2 for hver prøve og fortynning, noe som sikrer at platen er merket på riktig måte.

12 Dekk platene og invertere dem etter at agaren har stivnet på undersiden av platen. Tillate platene å sette i to dager ved romtemperatur.

1. 3 Undersøk platene og utføre ytterligere analyser.

Hint

• Avvik i prøvetakingsmetoder, fortynning løsning og kultur medier kan være nødvendig i noen situasjoner, og til kultur mer kresne bakterier.
• Denne metoden kan lette veksten av mange jord sopp og bakterier.