Hvordan kan jeg isolere bakterier fra jord?

Isolere bakterier fra jord er et viktig første skritt i mange mikrobiologi eksperimenter. Når de er isolert, kan bakterier bli ytterligere analysert for å bestemme ting, for eksempel deres art og deres funksjon i jordmiljøet. Selv en liten mengde av jord kan inneholde millioner av bakterier, noe som gjør det nødvendig å fortynne en jordprøve før isolering av bakterier fra prøven.

Bruksanvisning

1 Mål 100 ml. destillert vann i målesylinder og legge den til den sterile flasken.

2 Vei opp 1 g av jordprøven og legge den til flasken med destillert vann. Tett cap flasken og rist den for å grundig blande løsningen.

3 Merke sterile reagensglass "10 ^ -3», «10 ^ -4", "10 ^ -5» og «10 ^ -6". Legg 9 ml destillert vann til hvert av rørene, ved hjelp av en av pipettene.

4 Overføre 1 ml av oppløsningen i flasken til røret merket "10 ^ -3," ved hjelp av en ny pipette. Kork på røret og virvel den forsiktig inntil oppløsningen er godt blandet.

5 Overføre 1 ml av løsningen i "10 ^ -3" reagensrør til «10 ^ -4" rør med en ny pipette. Cap "10 ^ -4" rør og virvel å blande. Gjenta denne metoden for å overføre løsning fra "10 ^ -4" rør til "10 ^ -5" tube og deretter fra "10 ^ -5" rør til "10 ^ -6" tube.

6 Plate tre prøver hver fra "10 ^ -4", "10 ^ -5" og "10 ^ -6" rør. Bruke en ny pipette for å overføre 1 ml av oppløsning fra røret inn i en Petri-plate. Tilsett ca. 15 ml næringsagar til plate; deretter sette lokket på platen og virvle forsiktig, slik at agaren dekker bunnen av platen.

7 Foreta en styreplate ved å sette 1 ml destillert vann i en Petri-plate, ved hjelp av en ny pipette. Legg agar; Sett lokket på og virvle plate.

8 La petri platene oppreist til agar har satt. Deretter snu platene og ruge dem --- enten i en inkubator eller ved romtemperatur --- for så lite som 24 timer og opp til fem dager.

9 Fjerne platene fra inkubatoren etter at den ønskede mengde av inkubasjonstid. Tell bakteriekolonier på plater som inneholder ca 30 til 300 kolonier. Bruke en permanent markør for å merke koloniene man allerede har regnet for å unngå å telle de samme koloniene to ganger.

10 Del antall kolonier telles ved fortynning --- "10 ^ -4", "10 ^ -5" eller "10 ^ -6" --- av jord løsning for hver plate. Finne antall dyrkbar bakterier i den opprinnelige gram jord ved å ta gjennomsnittet av resultatene fra hver tellbar plate.