Hvordan lage Bacillus subtilis
I 1872, Ferdinand Cohn oppdaget bakterien Bacillus subtilis. Bacillus subtilis er funnet i luften, dekomponering plantemateriale, jord og vann. Den danner en endosporer, en tøff beskyttende ytre lag, som beskytter den mot miljømessige stressfaktorer som kjemisk eksponering, ekstreme temperaturer og næringsmangel. Bacillus subtilis har mange bruksområder, inkludert genetiske studier, industrielle applikasjoner og som en soppdreper. Det er lett isolert og dyrket i laboratoriet.
Bruksanvisning
1 Vei ut ingrediensene til nærings agar ved hjelp av et sett av balanse vekter. Legg kjøttekstrakt og pepton å agar for å gjøre nærings agar. Disse næringsstoffene tilveiebringe et vekstmedium for Bacillus subtilis. Legg ingrediensene i begeret. Plassere en glassrørestav i begerglasset.
2 Dekk begerglasset med aluminiumsfolie (blanke siden som vender mot innsiden av begerglasset). Plasser begerglasset i en autoklav.
3 Fjerner begeret fra autoklaven etter at agaren er sterilisert. Tidsrammen er avhengig av autoklaven du bruker. Bruk autoklav hansker. Løsningen vil være veldig varmt.
4 La begeret til å kjøle seg ned. Overvåke den nøye. Hvis agar kjøles for mye, vil det størkne; hvis det er for varmt, vil overdreven danne seg kondens på petriskål dekselet.
5 Rør agar med rørepinne. Helle den inn i en petriskål inntil agaren akkurat dekker bunnen av fatet. Dekk til petriskål og la agar stivner.
6 Snu fatet opp ned og la det tørke i 48 timer ved romtemperatur. Dette eliminerer overskudd av vann og reduserer kondensering.
7 Fylle et prøverør med 9 ml sterilt vann ved hjelp av en steril pipette. Vei opp 1 gram jord ved hjelp av et sett av balanse vekter. Legge den til reagensrøret. Bland godt.
8 Pasteurisere den fortynnede jordprøven ved 80 grader i 15 minutter. Plasser prøven på agar.
9 Inkuber agar ved 37 ° C i 48 timer.
10 Undersøk petriskål under et mikroskop. Du bør være i stand til å se kolonier av Bacillus subtilis. Koloniene kan være kjedelig, rynkete og fløte til brun i fargen.
Hint
- Du kan kjøpe kommersielt forberedt nærings agar fra et biologisk tilførsel huset, som Carolina Biological Supply Company.
- Oppretthold sterile forhold.
- Vær forsiktig når du arbeider med bakterier. Vask hendene ofte.