Hvordan lage en pH Buffer Solution

Hvordan lage en pH Buffer Solution


Forbereder bufferløsninger er en viktig grunnleggende ferdighet i biokjemisk forskning. De fleste biokjemiske teknikker og eksperimentelle protokoller bruke buffer. Siden enzymer og proteiner kan bli denaturert ved endringer i pH, kontrollere pH er viktig for proteinrensing. De mest brukte buffere er ved fysiologisk pH. I denne prosedyren, vil du lære å lage en 0,1 molar natriumfosfatbuffer ved pH 7,4.

Bruksanvisning

1 Ta på deg briller, frakk og hansker. Sørg for at pH-måleren er kalibrert i henhold til produsentens instruksjoner.

2 Legg ca 50 milliliter dH2O til begeret (det trenger ikke å være nøyaktig).

3 Vei opp 3 gram mononatriumfosfat og legge den til i beger. Rør til den er oppløst.

4 Sett forsiktig pH-meter uten banging tuppen mot bunnen av begeret og hold den stødig i begeret - det kan være en god idé å ha din lab partner hjelpe deg med denne delen.

5 Dersom pH er under 7,4, tilsett natriumhydroksid en dråpe om gangen under omrøring inntil den når omtrent 7,4. Hvis pH er over 7,4, derimot, tilsett saltsyre ved hjelp av pipetten på samme måte. Ikke overfør pipetten rett fra natriumhydroksid flasken til saltsyre flaske; vil forurense reagensene. Enten bruke to pipettene eller rengjør pipetten ut før du overfører fra den ene til den andre.

6 Hell blandingen i den volumetrisk kolbe og tilsett dH2O til bunnen av menisken når merket på siden av kolben. Kork på flasken og invertere det å blande oppløsningen på riktig måte.

Hint

  • Saltsyre og natriumhydroksyd er korrosive kjemikalier; de kan forårsake alvorlige brannskader på øyne og hud. Ikke la dem komme i kontakt med øyne, hud eller klær. Dersom en ulykke skulle skje, fjern tilsølte klær, vask det berørte området med vann i minst 15 minutter og kontakt lege snarest mulig.