Hvordan lage Stivelse Gel for elektroforese

For å analysere DNA gjennom elektroforese, må du først klargjøre gel. Som navnet tilsier, blir gelen laget av en blanding av en stivelse som kalles agarose, vanligvis selges i pulverform. Bland aldri gelen med rent vann - må du alltid bruke buffer eller annet du vil ha problemer når du prøver å kjøre gel. Følgende prosedyre er beregnet for elektroforese kamre størrelsen som vanligvis finnes i undervisningslaboratorier; hvis enheten er større eller mindre, juster mengdene av hvert kjemikalie som passer.

Bruksanvisning

1 Bland opp 350 ml 1X TAE buffer løsning. Siden den opprinnelige bestanden er 10X, bør du måle ut 35 ml av 10X lager deretter legge 315 ml avionisert H2O (dH2O) og virvle forsiktig for å blande. Du trenger bare 50 ml å faktisk gjøre det agarosegel; den gjenværende buffer vil bli brukt i elektroforese kammeret.

2 Hell 50 ml av en 1X bufferoppløsningen inn i Erlenmeyer-kolben. Mål opp 0,5 g agarose og legge den til kolben, deretter virvle å blande.

3 Stuff en Kimwipe i munnen på flasken og legg den i mikrobølgeovnen. Varme den i 1 minutt. IKKE la det stå uten tilsyn - slå av mikrobølgeovnen når løsningen i kolben begynner å koke. Hvis man overopphete løsning, vil det sprut mikrobølgeovnen og foreta en tidkrevende rot.

4 Ved hjelp av en Pasteur pipette, lå en tynn linje av gel langs stedet der skjermene i elektroforese kammeret berøre gelunderlaget. Plasser kammen over gel sengen slik at tennene med ansiktet ned mot sengen. Dybden av tennene med kammens skruene til de er like over bunnen av platen. De bør ikke berøre plate.

5 La gelen avkjøles til 60 grader Celsius - og da flasken vil fortsatt være varm. Legg fargestoff (f.eks etidiumbromid eller SYBR-safe) som anvist av protokollen.

6 Hell agarose inn i gelen seng og la den avkjøles før den stivner.