Hvordan lage Tris Buffere

Tris eller tris (hydroksymetyl) aminometan er et kjemikalie som er mye brukt i molekylærbiologi, spesielt i å ekstrahere DNA fra celleprøver for undersøkelse og analyse. Dens primære funksjon er som et buffermiddel, et kjemisk stoff som stabiliserer pH i en løsning for å forhindre forandringer i pH som kan påvirke utfallet av en reaksjon eller en renseprosess. Tris-buffere er bare egnet for anvendelser der den ønskede pH er mellom 7,2 og 9.

Bruksanvisning

1 Bestem buffer konsentrasjon og beløpet som du trenger. Konsentrasjonen vil variere avhengig av den type eksperiment man trenger å utføre. Rådfør prosedyren protokoll for eksperimentet til å finne passende konsentrasjon.

2 Beregn hvor mange gram Tris du trenger for volum og konsentrasjon av bufferløsning du fant i forrige trinn. Først multiplisere molariteten av bufferløsningen av volumet av bufferløsningen du trenger for å få antall føflekker. Deretter multiplisere antall mol av molekylvekten av Tris, som er 121.14 gram per mol. Dette vil gi deg antall gram.

3 Sett på den kjemiske beskyttelsesbriller og hansker. Utfør resten av dette eksperimentet under avtrekkshette for å minimere eksponering for damper. Saltsyre er en sterk øye og hudirriterende og er giftig ved svelging. La aldri saltsyre for å komme i kontakt med øyne, hud eller klær.

4 Legg omtrent halvparten av det totale volumet av vann må du erlenmeyerkolben. Hvis du trenger en liter buffer, for eksempel legge til ca 0,5 liter til kolben. Mål opp hvor mange gram Tris du fant i forrige trinn og oppløse den i vann.

5 Plasser pH-meter i oppløsningen og kontroller pH. Legg saltsyre hjelp av byretten til du kommer til pH du trenger til din buffer (dette vil variere avhengig av type eksperiment).

6 Hell blandingen ned i måleglasset og topp av med avionisert vann for å nå det totale volumet av buffer du trenger for eksperimentet.

Hint

  • PH i Tris buffere kan variere med temperaturen.
  • Saltsyre er en sterk øye og hudirriterende og er giftig ved svelging. La aldri saltsyre for å komme i kontakt med øyne, hud eller klær. Bruk hansker og kjemiske beskyttelsesbriller når du arbeider med HCl og utføre dette eksperimentet under avtrekkshette for å minimere eksponering for damper.