Hvordan Purge Cell Culture Medium Nitrogen

Biologiske studier bruker cellekulturer for å undersøke effekten av narkotika, terapi og praksis på de livssykluser og aktivitet av celler. Veksten av celler og vedlikehold av cellelinjer som forekommer i dyrkningsmedium som er gunstig for cellene i spørsmålet. Mediene gir alle næringsstoffer og miljøforhold som kreves av cellene. De fleste cellene trenger en kilde til nitrogen for å holde seg friske og for å levere noen av kravene for mange prosesser i cellene gjennomgår i løpet av sin livssyklus. Mens nitrogen er oppnåelig fra ammoniakk og andre nitrogenholdige stoffer, spyling av media tilveiebringer også en kilde for den nødvendige nitrogen.

Bruksanvisning

1 Hell din celledyrkingsmedium inn i et stort beger og plassere begeret på en mekanisk rører. Røreverket blander mediet under spyling med nitrogenstrømmen. Ved hjelp av denne fremgangsmåten vil tillate en fremstilling av en stor mengde medium for å opprettholde mer jevn sammensetning.

2 Påføre et spyle rør med utgangen fra en nitrogentank. En spyling rør består av et glassrør med en bærer av sintret glass spiss inkorporert inn i enden av røret. Den åpne ende av røret er festet til en lengde av plastrør som er koblet til en nitrogentank tilveiebringer en strøm av nitrogen som de kommer ut av bærer av sintret glass ende av røret ved flere strømmer av små gassbobler.

3 Plasser bærer av sintret glass enden av spyleslangen inn i bunnen av begeret og slå på blanderen. Angi at rørehastigheten av en mekanisk rører for å gi jevn blanding av mediet.

4 Slå på strømmen av nitrogen ved tanken og tillate det å boble inn i mediet. Nitrogenet vil mette det medium med nitrogen mens den er oppløst. Hver væske besitter en begrenset løselighet av ulike gasser. Som nitrogen oppløses i mediet, andre oppløste gasser støtes ut fra mediet. Purging fjerner gasser så som oksygen og karbondioksyd fra kulturmediet.

5 Tillate den nitrogenstrøm til å boble i minst 15 minutter for å mette mediet, avhengig av strømningshastigheten for gassen. Når sletting av mediet er ferdig, fjerner du bærer av sintret glassrøret fra begeret og overføre renset cellekulturmediet til en lukket beholder og oppbevar den i kjøleskapet. Den reduserte temperatur i kjøleskapet vil redusere den grad ved hvilken gasser oppløses i mediet under lagring.