Metoder plasmatriglyseridnivåer Extraction

Triglyserider i plasma er indikatorer på mange ulike helsemessige forhold. Triglyserider er fett molekyler som er mer oppløselige i organiske løsningsmidler enn vann. Ekstraksjonsmetoder er basert på løsningsmiddel / vann partisjonering og adresseserumproteiner som følger triglyserider i plasma.

Total Lipid Extraction

Triglyserider kan hentes ut som en del av total plasmalipider. Kloroform er kanskje den mest effektive organiske løsemidler for totalt lipid ekstraksjon. For eksempel ta 200 mikroliter plasma. Tilsett 300 pl kaliumfosfat, monobasisk, 1,5 ml kloroform og 0,5 ml metanol. Vortex eller rist prøven kraftig i 2 til 5 minutter. Samle den nedre (organiske) fase med en pipette og tørr under nitrogen for å få det totale lipid fraksjon inneholdende triglyceridene. Det generelle prinsipp for organisk ekstraksjon er å benytte en organisk fase som er uoppløselig med vann slik at lipidene er delt inn i den organiske fase og adskilt fra resten av prøven.

Skille Triglyserider fra andre lipider

Specialized laboratorieapparat er nødvendig for separasjon av triglyserider fra bulk lipider. Vanlige ekstraksjonsmetoder omfatte HPLC (høy ytelse væskekromatografi), GC (gasskromatografi), MS (massespektrometer) og kombinasjoner av disse teknikker. Ulike analytiske protokoller brukes for å bestemme forskjellige typer informasjon om lipider slik som triglyserider i blodet.

andre hensyn

For å unngå bruk av kloroform (som er toksisk) kan heksan og isopropanol anvendes som det organiske oppløsningsmiddel. Bland 3/2. Det organiske sjiktet blir det øverste laget, ikke bunnsjiktet som når kloroform anvendes. Ekstraherte lipider bør ikke lagres i tørr tilstand. Det er best å lagre ekstraherte lipider i kloroform / metanol-blandinger ved -70 ° C Lipids skal lagres i glassbeholdere med Teflon foringer på hettene. Antioksidanter slik som BHT kan tilsettes for å forlenge sikker lagring.