Rollen av Taq polymerase i PCR

Rollen av Taq polymerase i PCR


Polymerase kjedereaksjon, eller PCR er en metode forskerne bruker for å gjøre millioner av eksemplarer av et segment av DNA. Polymeraser - en type enzym protein - bidra til å bygge de nye segmenter. Forskere bruker ofte Taq polymerase i PCR.

Historie

Taq polymerase kommer fra bakterien Thermus aquaticus, som lever i varme kilder. Kary Mullis og Fred Faloona opprinnelig utviklet PCR på midten av 1980-tallet ved hjelp av en polymerase fra Escherichia coli, men forskerne snart begynte å bruke Taq i PCR fordi det var mer egnet for høye temperaturer.

Funksjon

PCR innebærer denaturerende, annealing og replikering trinn, vanligvis gjentatte 20 til 30 ganger. Denaturering skiller dobbeltkjedet DNA i enkelttråder. I glødetrinn, primere bindes til de segmenter av DNA som skal kopieres. Taq-polymerase fortsetter å arbeide i replikasjons trinnet: polymerase bygger hver enkelt streng av DNA som er merket med en primer til en ny, dobbeltkjedet DNA-segment.

fordeler

De høye temperaturer som er nødvendige for å denaturere DNA ødelagt E. coli polymerase opprinnelig brukt i PCR, noe som krever ny polymerase for å bli lagt til etter hver PCR-syklus. Taq polymerase tåler disse temperaturene, så forskerne kan nå kjøre mange PCR-sykluser automatisk.

betraktninger

Taq polymerase gjør et relativt høyt antall feil når du kopierer DNA. Andre polymeraser som er stabile ved høye temperaturer har lavere feilrater, men Taq er fortsatt den mest brukte på grunn av sin pålitelighet og allsidighet, i henhold til Colorado State University.