Tre typer av syrefaste Flekker

Mikroskopi er å bruke teknologi for å gjøre ting som er svært lite synlig for det menneskelige øyet. Forskere som ser mikroorganismer og bakterier gjennom mikroskop må noen ganger bruke en prosedyre som kalles flekker å bedre se eller differensiere bestemte deler av disse mikroskopiske skapninger. Flekker selv er stoffer som holder seg til cellene, noe som gir dem farge. Det finnes flere typer flekker som passer visse mikroskopiske organismer bedre enn andre. Det er enkle flekker, differensial flekker, gram flekker, negative flekker og syrefaste flekker.

Syrefaste organismer og syrefaste Flekker

"Acid-hurtighet" refererer til en bestemt fysisk egenskap av visse bakterier, nemlig deres evne til å motstå syre bleiking under fargingsprosedyrer. Disse resistente organismer er kalt "syrefaste organismer", og kan bare være farget for visningsformål ved hjelp av syrefaste flekker. Det er tre primære flekker brukes for vellykket farging syrefaste organismer: den Ziehl-Neelsen flekken; den Kinyoun metoden; og enkelte fluorescerende fargestoffer.

Ziehl-Neelsen Farging

Den Ziehl-Neelsen flekken er en spesiell bakteriologisk flekk som brukes til å vise syrefaste organismer, først og fremst Mycobacteria. Syrefaste organismer som er farget med Ziehl-Neelsen flekken blir rød. Fremgangsmåten for Ziehl-Neelsen farging er som følger:

Dekk med silkepapir (valgfritt).

Dekk objektglass med carbolfuchsin, den primære flekken, i 3 til 5 minutter under oppvarming med damp eller oppvarming på en Bunsen-brenner.

Fjern silkepapir hvis anvendt, decolorize lysbilde ved anvendelse av en blanding av etanol og saltsyre. "

Counterstain bruker malakittgrønt eller metylenblått.

Kinyoun Farging

Den Kinyoun flekken er en annen metode som brukes i flekker syrefaste mikroorganismer. Det ligner på Ziehl-Neelsen flekken, med den primære forskjellen er at du ikke varme opp raset ved søknad Kinyoun flekker. Under et mikroskop, vil farget organismer vises blå. Fremgangsmåten for påføring av Kinyoun flekker er som følger:

Dekk lysbilder med Kinyoun carbolfuchsin i 5 minutter og skyll med vann inntil det kommer av klart.

Dekk lysbilder med syre-alkohol - 3 prosent HCl i etanol - i 3 minutter og skyll igjen med vann inntil det kommer av klart.

Cover lysbilder med metylenblått fargestoff i 3 minutter og skyll forsiktig med vann inntil det kommer av klart.

La lysbilder lufttørke før visning.

Auramine-Rhodamine Farging

Den Auramine-rhodamine flekken, noen ganger kalt Truant Auramine-rhodamine flekken, er en teknikk som brukes for å vise syrefaste mikroorganismer ved hjelp av fluorescens mikroskopi. Når spesifikke forbindelser er belyst ved hjelp av høy-energi lys, har de en tendens til å sende ut en annen, lavere frekvens lys som et resultat av eksponering. Dette kalles fluorescens. Syrefast mikroorganismer avgir en rødlig-gul fluorescens med denne metoden. Den Auramine-rhodamine flekken kanskje ikke være så spesifikk for syrefaste organismer som de Ziehl-Neelsen eller Kinyoun flekker, men det er mer rimelig og er ofte brukt som et screeningverktøy.