Trinn i DNA Extraction

Det grunnleggende

DNA (deoksyribonukleinsyre) ekstraksjon er en prosess med mange viktige vitenskapelige anvendelser. I forskning og medisin, dets bruksområder inkluderer DNA-sekvensering, påvisning av virus og bakterier, og etterforskningen av genetisk baserte sykdommer og lidelser. I feltet for rettsmedisin, blir det brukt for å identifisere de døde og de levende, så vel som for åstedet analyse. Til tross for sin sofistikerte resultater, DNA-ekstraksjon i seg selv er faktisk ganske enkelt, og grunnleggende utvinning teknikker fungerer like godt i et forskningslaboratorium eller hjemme.

DNA-ekstraksjon begynner med å anskaffe en DNA-prøve. Siden alle levende organismer inneholder DNA, de tilgjengelige prøve alternativene er tilnærmet uendelige, og valget vanligvis forholder seg direkte til emnet som studeres. Menneskelig DNA er lett oppnås ved dabbing innsiden av en persons kinn med en bomullspinne. Planteprøver kan oppnås ved å kutte ut en del av kildematerialet.

Utvinning i Lab

Når en prøve er oppnådd, må det bli brutt ned for å få tak i det genetiske materialet inne i individuelle celler. I laboratoriet blir en prøve typisk plassert i en enhet kalt en Eppendorf-rør. En spesiell løsning blir så tilsatt til røret, og røret er plassert i et varmt vannbad. Hensikten med løsningen er å lysere (bryte opp) materialets cellestruktur. Den inneholder to hovedingredienser: en spesialdesignet vaskemiddel og et enzym kalt proteinase K. Når i varmt vannbad, spiser vaskemiddel bort prøvens cellulære membran, så vel som den nukleære membranen som omgir cellens arvestoff. Når disse membraner er avbrutt, den proteinase K bryter fra hverandre et protein kalt histon, som er viklet rundt DNA.

Den Eppendorf-rør blir deretter fjernet fra vannbadet, og en konsentrert saltoppløsning tilsettes for å klumpe seg sammen den uønskede proteiner og celleavfall. Røret plasseres deretter i en liten sentrifuge, hvor sentrifugalkraften forlater DNA diffundert i et lag av oppløsning over den tyngre overskytende materiale. DNA blir deretter fjernet og lagt inn av seg selv på en annen tube. Isopropylalkohol ble tilsatt til DNA og blandet grundig. Denne prosessen tvinger DNA ut av løsningen, klumper den inn synlige tråder. Materialet blir deretter satt inn i sentrifugen en mer tid for å tvinge DNA-trådene sammen. Alkoholen fjernes, og DNA fikk tørke. Når denne prosessen er fullført, kan det resulterende DNA-prøven lagres og anvendes for et hvilket som helst av de mange formål.

Utvinning hjemme

Den samme grunnleggende Ekstraksjonsprosessen kan utføres hjemme, ved hjelp av frukt, grønnsaker eller kjøtt. Det valgte materialet er plassert i en husholdning blander sammen med kaldt vann og bordsalt. Når disse elementene blandes sammen, blir den resulterende oppslemming siles inn i en annen beholder. Flytende vaskemiddel blir deretter tilsatt, og denne blanding anbringes i et reagensglass og tillatt å stå i en stund. Deretter kjøtt mørsalt eller ananassaft ble tilsatt for å tilveiebringe nødvendige enzymer. Det siste trinnet er tillegg av rensevæske, som tvinger DNA til å klumpe seg inn i tråder som kan trekkes fra reagensrør.