Hva er Western Blot Brukes til?

Biomedisinske forskere og medisinske laboratorier finner det ofte nødvendig å bestemme om et gitt protein som er til stede i en prøve. Western blotting er en teknikk som gir en måte for å detektere tilstedeværelsen av et protein i en vevsprøve eller ekstrakt.

Egenskaper

I Western blotting, er proteiner fra en prøve separeres basert på deres størrelse og ladning gjennom en teknikk som kalles gelelektroforese. Proteinene blir deretter overført til en nitrocellulosemembran, og en løsning inneholdende et antistoff blir tilsatt. Antistoffet er spesifikk for, og vil bare bindes til proteinet av interesse. Deretter blir en oppløsning som inneholder et andre antistoff som er spesifikt for det første antistoffet tilsettes. Det andre antistoffet er merket med en radioaktiv isotop, slik at dersom proteinet av interesse var i prøven, vil radioaktiv markør markerer dens nærvær.

Funksjon

Western blotting benyttes i både vitenskapelig forskning og medisinsk diagnostikk. I medisin, kan den brukes til å teste for HIV eller Lyme-sykdom i blodprøver. I forskning, er det ofte brukt for å bestemme hvorvidt et bestemt protein som er til stede i en gitt celletype, og hvor mye av proteinet kan være til stede.

betraktninger

For medisinske tester som Lyme-sykdom, Western blotting brukes i forbindelse med en teknikk som kalles ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). ELISA kan noen ganger gi falske positive resultater. Western blotting bidrar til å bekrefte ELISA-testresultater.