Hvordan måle katalaseaktivitet
Alle levende celler produsere en liten mengde av toksisk hydrogenperoksyd. Heldigvis alle celler har evnen til å bryte dette ned i uskadelig vann og oksygengass. Celler gjøre dette via et enzym kalt "katalysator", spesielt et enzym. Et enzym er en biologisk forbindelse --- nesten alltid et protein --- som senker aktiveringsenergien av en kjemisk reaksjon. I dette tilfellet, øker hastigheten enzymet katalase opp dekomponeringen av hydrogenperoksyd til vann og oksygengass, og hjelper-celler kvitte seg med denne giften. Science studenter kan enkelt måle katalase aktivitet ved øyet.
Bruksanvisning
1 Puré leveren inn i en væske. Leveren bør være så blandet at ingen del av det er visuelt annerledes enn resten.
2 Mål opp en bestemt mengde lever puré --- vanligvis 1 ml, men enhver konsistent mengde ville fungere --- med målesylinder. Fordel det i flere reagensrør. Prøv å få så lite som mulig på sidene av reagensrørene.
3 Rengjøre målesylinder grundig, deretter måle ut en forutbestemt mengde av hydrogenperoksyd.
4 Legg inn hydrogenperoksid til en sylinder av pureed leveren. Blandingen vil boble inn i et hvitt skum som den enzym frigjør oksygengass. Måle høyden av det hvite skum med en linjal i millimeter.
5 Varier de reaksjonsbetingelser. Prøv å redusere temperaturen ved å plassere prøverør i varmt eller isvann --- men ikke får noe vann inne i røret. Du kan også se effekten av å endre pH med eddik --- som senker pH --- eller natron --- som hever den. Mål som før og sammenligne forskjellige forhold. Til slutt kan du observere hvordan større mengder av underlaget i forhold til forsøk med større mengder av enzymet.
Hint
- Enzymer har en tendens til å fungere best på forholdene i organismen de kommer fra. For eksempel, vil dette enzymet fungere best på rundt kroppstemperaturen til en ku.
- For studenter som er ubehagelig å jobbe med deler av dyr, kan katalase kjøpes som en plate fra laboratorium leverandørselskaper, men det er mer kostbart.
- Må ikke svelges noe fra denne lab.
- Bruk hansker når du håndterer rå animalske produkter.
- Bruk vernebriller når du arbeider med peroxide.