Mekaniske metoder for Cell Disruption

Celle avbrudd, også kjent som lyse, er det tilsiktet sprekker av cellemembranen for å frigi spesifikke intracellulære biologiske molekyler. Det er to generelle kategorier av celleoppbrytning: kjemisk avbrudd og mekanisk ødeleggelse. Mekanisk celleoppbrytning kan utføres gjennom en av fem metoder: homogenisator; ball / kulemølle; ultralyd avbrudd, eller ultralydbehandling; fast geometri væske prosessor; eller bruk av en blender, fransk trykk eller sentrifuge.

homogenisator

En homogenisator består av to kamre og en homogenisering ventil. Cellene er plassert i det første kammer, som settes under trykk opptil 2500 bar. Cellene blir deretter tvunget gjennom den homogenisere ventilen inn i det andre kammer, som har et mye lavere trykk. Den plutselige trykkendring bevirker at cellen til å ekspandere og deretter eksplodere og frigi de intracellulære molekyler.

ball Mill

En kulemølle inneholder partikler av glass eller andre slipepartikler. Cellene er plassert i suspensjon og deretter omrørt. Skjærkrefter vil føre til at cellene brister og frigjør de intracellulære partikler.

Ultralyd Forstyrrelse

Celler kan også bli forstyrret av ultralyd. En elektronisk generert høyfrekvent lydbølge blir overført til den celle-inneholdende prøve, noe som fører til hulrom i cellesuspensjonen som fører til celle-nedbrytning. Ultralyd avbrudd er svært dyrt og brukes kun for celler med mindre resistente celleveggene.

Fast-geometri Fluid prosessor

Fast geometri fluid prosessorer, markedsført under navnet "microfluidizers", bruker et trykkpumpesystem for å oppnå trykk på opp til 30000 psi, noe som skaper betydelig høyere skjærkraft enn andre avbrudd metoder.

Blender / French Press / Sentrifuger

Blandemaskiner og andre apparater kan brukes til å skape tilstrekkelig trykk til å sprenge celleveggene. Men disse mindre sofistikerte metoder ikke har den samme virkningsgrad eller styrke som de mer avanserte prosesser.