primer Protocol

Primere blir brukt i laboratorieteknikk som kalles polymerase kjedereaksjon (PCR). Denne teknikken forsterker en liten mengde DNA til eksponentielle tall. Ved å bruke den korrekte PCR-primeren er viktig for DNA-amplifiseringen prosessen.

Velge PCR primere

Å velge en PCR-primer avhenger av den nøyaktige forsøket blir utført. Programvareverktøy er tilgjengelig for å hjelpe på primer design for et eksperiment. Disse verktøyene lette primer design gjør forskerne å finne spesifikke primere som trengs for deres eksperiment.

reaksjons~~POS=TRUNC

Velge antall sykluser for PCR for å bli kjørt så vel som temperaturen og varigheten av hver syklus. Antall sykluser er betinget av hvor mye DNA-mål er det, samt hvor mye PCR-produkt blir forsterket. Den standard mengde av sykluser varierer 25-35.

DNA Denaturering

Før primere blir brukt, må DNA denatureres til en enkelt tråd, i stedet for dens dobbeltstrenget. Dette gjøres ved å oppvarme DNA ved temperaturer høyere enn 90 ° C i 30 sekunder.

primersammensmeltning

Etter DNA denaturering utføres i PCR prosedyren, må primersammensmeltning etter gjennomført. Primersammensmeltning tillater PCR primere for å finne sine komplementære mål og feste seg til den. Temperaturen som brukes må koordinere med smeltetemperaturen av primeren som blir anvendt.