Verktøy Brukes for DNA fingerprinting

Verktøy Brukes for DNA fingerprinting


Prosessen med DNA fingerprinting har noen spesialiserte verktøy innenfor laboratoriene som utfører analysen. Ulike verktøy arbeider sammen for å tillate DNA for å bli kuttet i fragmenter og sammenlignet med andre prøver av DNA. Mens det er viktig å forstå at resultatene ikke identifisere en enkelt person, det bestemmer den slektskap fra en prøve til en annen. Gjentatte sekvenser som varierer mellom individer er det element som blir ettertraktet å bruke i denne analysen. Forskere bruke en rekke fragmenter for å oppnå de mest nøyaktige forhold.

restriksjonsenzymer

Dette er spesialiserte enzymer som spalter DNA basert på en spesifikk sekvens i basene. Forskjellige enzymer benyttes til å skjære på forskjellige steder. Noen vil kutte rett over gjør en butt ende og andre vil kutte i en offset måte å gjøre "klebrige ender." Restriksjonsenzymer konsekvent vil kutte i når de møter en gjenkjennelsessekvens. Dette gjør mange konsistente fragmenter som nå kan separeres og omgjort til et kart. Uten dette verktøyet, vil DNA fremdeles være i det kromosomale form, og ville ikke være i stand til å bli brukt for et fingeravtrykk.

gel elektroforese

DNA-fragmenter blir ført gjennom en gel, typisk agarose, med en elektrisk ladning. Når den elektriske ladning påtrykkes på fragmentene, de reiser fra den ene siden til den andre. Fragmenter mindre i størrelse vil reise lenger enn sine større kolleger. De forskjellige fragmenter gjør grunnlag av "fingeravtrykk" som skal sammenlignes. En standard stige, en blanding av kjente fragmentstørrelser, kjøres samtidig for å sammenligne den fragmentstørrelse. Dette verktøyet kan DNA som skal separeres i forhold til størrelse på en mikroskopisk skala.

Southern blot

En sørlig blot tar DNA-fragmentene fra en elektroforese gel og fikser det til nitrocellulosepapir. En elektrisk strøm blir tilført gjennom nitrocellulosepapiret til å bevege DNA fra gelen til papiret. DNA blir deretter permanent festet til nitrocellulose ved anvendelse av enten varme eller kjemikalier. Etter at southern blot er gjort, er den klar til å bli lagret og analysert på et senere tidspunkt. En radioaktiv probe er integrert på DNA, slik at det kan visualiseres for en analyse. Sonden gjør at fragmentene som skal visualiseres, uten at det fragmentene ikke ville være synlige. Røntgenbilder tas av resultatet for å oppnå et bilde, er det selve komponenten som brukes i analysen.

Polymerase kjedereaksjon

Når det er en begrenset mengde prøve er tilgjengelig for analyse, kan en polymerase kjedereaksjon (PCR) selektivt å forsterke visse fragmenter. Den bruker en prosess som involverer separasjon av DNA-trådene, å feste en primer-sekvens og replikere sekvensen. Denne prosessen blir utført flere ganger for å oppnå en stor mengde av den valgte sekvens. Etter en PCR-reaksjon har funnet sted, kan de replikerte fragmentene bli lastet inn i en gel-elektroforese for analyse. PCR, i dette tilfellet er bare et verktøy som benyttes når størrelsen av prøven er svært begrenset. Selv om det meget vanskelig å gjøre, kan en gyldig DNA-fingeravtrykk oppnås fra en enkelt celle ved hjelp av PCR-prosessen.

dataprogrammer

Bruk av datamaskiner i feltet av vitenskap har gjort komplekse beregninger og sammenligninger raskere å fullføre. Når en rettsmedisinsk tilfelle innebærer en ukjent person, kan noen sekvenser sammenlignes med en database for å foreslå mulige treff. På grunn av de høye kostnadene ved å gjøre et DNA-fingeravtrykk-analyse, kan alle mennesker ikke være i en database, men enkelte kjente forbrytere kan finnes. Datamaskiner er ikke en kritisk del av selve fingerprinting prosessen så mye som det er behov for i analysen av dataene. Uten dette verktøyet kan ta analysen del lenger og være mye dyrere på grunn av spesialiserte lønnskostnader.