Hvordan Flekk Saccharomyces

Saccharomyces er en slekt av sopp som omfatter mange gjær. Disse syrefaste mikroorganismer er viktig for produksjon av brød, vin og øl. Saccharomyces celle og ascusporer den produserer kan farges for bedre kontrast, noe som gjør dem lettere å se med et lysmikroskop. Det finnes flere metoder for å flekke Saccharomyces; mest flekken ascusporer og cellene forskjellige farger. Standard Gram-farging prosedyren er en pålitelig og enkel metode for å flekke Saccharomyces flekker.

Bruksanvisning

Forbereder lysbildene

1 En liten dråpe av sterilt avionisert vann i midten av sleiden. Med riktig aseptisk teknikk, bruk inokulering sløyfen for å smøre en liten mengde av kulturen inn i dråpen.

2 La lysbilde for å lufttørke. Dette kan ta litt tid, avhengig av hvor mye vann du legger på lysbildet og hvor tynn du smurt kulturen. Den smøre bør være helt tørt før du fortsetter.

3 Varme feste glide ved å føre den over flammen to eller tre ganger. Dette dreper cellene på lysbildet.

gram Farging

4 Svømme varme fast lysbilde med krystallfiolett. La det stå i 60 sekunder, og skyll forsiktig med vann fra springen.

5 Flood lysbildet med jod og la sitte i 60 sekunder, og skyll med vann fra springen.

6 Decolorize med etanol eller aceton. Hold lysbildet på skrå og sprute med decolorizing agent for tre sekunder, la decolorizer og overflødig fargestoff kjøre av raset. Ikke over-decolorize. Skyll straks med vann.

7 Counterstain ved flom lysbildet med safranin i to minutter. Skyll med vann og tørk tørt med tørkepapir.

Når cellene blir sett med mikroskopet, vil ascussporer være Gram-negative (rosa) og de vegetative Saccharomyces-celler vil være i Gram-positive (fiolett).

Hint

• Andre fremgangsmåter for farging kan anvendes, inklusive Ziehl-Neelsen syrefaste flekker, Kinyoun farging eller Schaeffer-Fulton farging. Hver er pålitelig med Saccharomyces.
• Vokt dere for over-decolorizing. Hvis du over decolorize, de ascusporer og vegetative cellene vil alle synes Gram-negative.