Hvordan lage buffer med en pH Meter

Kjemi og biokjemi prosedyrer ofte hengsel på reaksjoner som utføres på et bestemt pH. Slike reaksjoner dra nytte av bruken av en bufferløsning, som er en forbindelse kvantifisert ved sin motstand mot pH-endringer når enten sterke syrer eller baser tilsettes til den. Utfører disse prosedyrene krever en forståelse av blandingsbufferløsninger samt kalibrering og bruk av pH-meter.

Bruksanvisning

1 Velger bufferløsning salter med riktig pH grense for reaksjonen. Individuelle proteiner og reaksjoner har spesifikke pH-krav. Kravene er uttrykkelig angitt i reaksjonen protokollen, presentert i dokumentasjonen som følger med protein / prøve eller spilt inn i slike referansevolum som Handbook of Chemistry and Physics. En optimal bufferoppløsning pH bør ligge så nær som mulig til reaksjons pH-enhet og bør aldri overstige pluss eller minus en pH-verdi. Bufferløsning salter er tilgjengelig som en pakke eller kan blandes fra rå komponenter følgende allment tilgjengelige oppskrifter.

2 Hell bufferoppløsning i en 1-liters begerglass. Tilsett 1 liter destillert vann. Sett en rørestav i begerglasset og sett begeret på en gripende plate. Aktiver rørerplate med en lav til middels innstilling. Rør til ingen bufferløsning krystaller være synlig.

3 Sett 100 ml beger under pH-meter testing nål. Rens nålen ved å spraye det med destillert vann. Begeret vil fange run off. Kalibrere pH-meter ved hjelp av kalibreringsløsninger. Rengjør p igjen. Kast de avrenning innholdet fanget i 100 ml beger.

4 Bringe pH-meter til den omrørte plate og 1-liters begerglass. Introduser testing nål inn i bufferoppløsning. Skyv pH-meter beregning for å fastslå løsningens pH. Hvis denne verdien er for høy eller lav, krever løsningen i tillegg følgende trinn.

5 Plasser en frisk mikropipette spissen på micropipetter. Aktiver rørerplate med lav hastighet. Dersom pH-verdien er for høy, bruker micropipetter for å legge til en dråpe om gangen av saltsyre til løsningen. Tillat den omrørte platen for å blande oppløsningen og måle pH. Gjenta prosessen til løsningen pH er nødvendig verdi. Dersom pH er for lav, gjenta dette trinnet ved hjelp av natriumhydroksyd i stedet for saltsyre.

Hint

• Bruk alltid rent utstyr for å unngå innføring av bakterier eller andre forurensninger i din løsning.
• Reaksjoner krever ofte en nøyaktig pH. Selv en liten avvikelse kan resultere i et mislykket forsøk.