Mini Prep Protocol

Når jeg prøver å isolere eller oppdage et gen av interesse, mini-forbereder er en viktig forløper trinn. Etter denne protokollen nettopp vil gi deg en tilstrekkelig ren form av DNA, klar for polymerase kjedereaksjon, eller PCR, forsterkning.

Hva er en Mini Prep?

Mini-preps er standard protokoller, karakterisert ved at DNA fra en prøve blir ekstrahert og renset for det formål å isolere en eller flere gener av interesse. En rekke protokoller er blitt dokumentert og testet for deres effektivitet. Imidlertid protokollen man ønsker å bruke vil avhenge av typen av prøven.

Trinn for en Mini Prep Protocol

De suitabilities av en rekke ulike protokoller avhengig av type og antall eksemplarer du trekke ut DNA fra.

The University of Florida og Cornell University mini-prep protokoller - orientert mot DNA-ekstraksjon fra bakteriekolonier - forskjellig i de løsningene som brukes og enten kan være mer egnet basert på tilgang til visse reagenser. Alternativt kan du bruke de automatiske QIAprep Spin miniprepp kits for DNA rensing. Men disse Blant ekstraksjon dyrere.

For Drosophila DNA-ekstraksjon, har Berkeley BDGP nettstedet en nyttig protokoll for en rask flue genomisk DNA prep.

Sammendrag

Mange mini-prep protokoller finnes, varierende i de løsninger og reagenser som brukes og i deres praktiske for ulike DNA-typer. Kontroller at du har alle de riktige ingrediensene før du forplikter deg til noen av de refererte protokoller; om du ikke ønsker å kaste bort potensielt verdifulle og begrensede eksemplarer.